Ce este cromatografia HPLC și de ce este importantă?
Odată cu dezvoltarea tehnologiei medicale, oamenii au început să caute soluții care să ajute la descoperirea unor noi proprietăți ale diferitelor substanțe. Cromatografia lichidă joacă un rol important în studiul și analiza diferitelor amestecuri , care, prin separarea moleculelor separate din probă, permite examinarea compoziției acesteia.
Ce este cromatografia lichidă de înaltă performanță(HPLC)?
Cromatografia ionica este o tehnică care este concepută pentru a separa și identifica cu precizie componentele dintr-o anumită substanță. Este folosit în cele mai moderne laboratoare din toate țările foarte dezvoltate. Este una dintre cele mai precise și eficiente metode de a distinge ingredientele dintr-un amestec dat. Pentru acest tip de cercetare se folosesc echipamente specializate – un analizor cromatografie HPLC.
Cum funcționează HPLC?
Cromatografia HPLC este o metodă semnificativ îmbunătățită de împărțire a substanțelor în comparație cu cromatografia pe coloană. Un cromatograf HPLC are o pompă care forțează solventul să treacă prin coloană la presiune ridicată până la 400 de atmosfere. Substanța care umple coloanele, adsorbantul sau faza staționară este un material granular care este format din particule solide, adică silice sau polimeri.
Folosind presiune înaltă, cromatografia HPLC este mult mai eficientă și mai rapidă decât cromatografia pe coloană. Datorită acestui fapt, particulele mult mai mici pot fi testate ca material pentru a umple coloana. Dimensiunea mai mică a particulelor afectează în mod semnificativ suprafața de interacțiune dintre faza staționară și particulele care curg pe lângă aceasta. Acest lucru face ca diviziunea componentelor substanței să fie mai rapidă și mai eficientă.
Tipuri de HPLC
Cromatografia lichidă de înaltă performanță poate fi împărțită în două tipuri:
- HPLC în fază normală
În acest tip, coloana este umplută cu particule fine de silice amestecate cu un solvent nepolar. Diametrul interior mediu al coloanei este mai mic de 4,6, iar lungimea acestuia este cuprinsă între 150 și 250 mm. În substanța testată, compușii nepolari trec prin coloană mai repede, deoarece compușii polari se lipesc de siliciu mai mult timp.
- HPLC cu fază inversă
În cromatografia cu fază inversă, dimensiunea coloanei este identică. Într-o coloană plină cu silice, moleculele sunt modificate pentru a fi nepolare. Acest lucru se datorează adăugării de lanțuri lungi de hidrocarburi (8-18 atomi de C) la suprafața sa. Această metodă folosește un solvent polar, de exemplu metanol. Compușii polari din această substanță vor începe să treacă prin coloană într-un ritm mai rapid. Funcționează în acest fel deoarece există o atracție puternică între solventul polar și moleculele polare din amestec.
